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哪些因素影響著固相萃取回收率的結果

點擊次數:2506 更新時間:2022-12-12

  固相萃取儀將固相萃取的各個步驟有效的集成于一個平臺,可實現整個固相萃取過程(活化、上樣、淋洗、干燥、洗脫)的全自動操作,大大提高了樣品前處理的效率,將分析工作者從繁瑣的前處理工作中解脫出來,使樣品前處理更快捷、高效。
  SPE技術中萃取回收率衡量著檢測分析結果的準確度,除了分析儀器帶來的誤差對回收率的影響之外,在固相萃取中還有以下因素影響著回收率。
  一、pH對固相萃取回收率的影響
  根據吸附機理,固相萃取主要分為正相保留模式、反相保留模式、離子交換作用模式。
  正相保留模式
  我們所使用的溶劑多為非極性的有機溶劑,pH對正相保留的影響并不是很大。
  反相保留模式
  調節pH的主要目的是使目標化合物或者雜質充分質子化,保持分子狀態。以硅膠鍵合十八烷基碳鏈(C18小柱)為例,對于現在的商品化鍵合硅膠固相萃取小柱,其封尾率最多在70%左右,還有30%的硅羥基存在。當化合物處于離子狀態時,C18對化合物的容量因子會大大降低。
  當分析部分堿性化合物時,若萃取環境的pH同時使堿性目標化合物和硅羥基解離帶相反電荷,按照正常的非極性洗脫方法是無法將目標化合物洗脫出來的,因為堿性目標物與硅羥基之間形成了相反電荷之間的靜電吸引,必然導致回收率降低。當分析部分酸性化合物時,也要注意控制pH,例如,呈離子態的酸性除草劑在C18柱上基本不保留或很少保留。而在萃取前對樣品溶液進行酸化,使其呈中性狀態,就可以提高回收率。
  二、SPE柱容量對回收率的影響
  SPE小柱中填料的質量影響著其吸附容量,吸附容量指的是在特定條件下,一定質量的吸附劑能夠保留的化合物(包括目標化合物和部分干擾物)的總質量。常見規格吸附容量如下:
  硅膠基質
  柱容量不超過SPE填料質量的5%,例如100 mg/1mL的C18小柱可以保留5mg的化合物。
  聚合物基質
  柱容量是硅膠基質吸附劑的3倍,例如100 mg/1mL的BRP小柱可以保留15mg的化合物。
  離子交換吸附劑
  交換容量為0.25-1mmol/g,1mmol/g表示1g吸附劑能吸附1mmol的一價帶電物質。
  所以在固相萃取中根據上樣量來選擇合適的填料規格至關重要,當上樣量超過了吸附劑填料的吸附容量,目標化合物就不再被吸附劑所保留,而是會隨樣品基質流出SPE小柱,導致回收率下降。
  三、流速對固相萃取回收率的影響
  在固相萃取中,流速主要包括:活化流速、控制樣品通過SPE柱的流速和從SPE柱上洗脫目標化合物的流速。
  活化流速
  活化主要是使吸附劑填料上官能團充分舒展開來,提高對目標化合物的吸附效率,從而提高萃取回收率。此外,還可以除去商品化小柱中可能存在的雜質和干擾物。對流速的要求是不能太快,一般保持在1mL/min。
  樣品通過SPE柱的流速和從SPE柱上洗脫目標化合物的流速也是兩個十分重要的因素。

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